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DH5α感受態細胞

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價格 ￥1200 - 3500
產地進口/國產
貨號 KL1148
品牌 KALANG
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- 保存條件：
  -70℃
- 保質期：
  6個月
- 英文名：
  DH5α Ultracompetent cells
- 數量：
  50
- 供應商：
  康朗生物
- 規格：
  20×100μl
DH5α感受態細胞基本信息
感受態細胞名稱:?? ?DH5α Ultracompetent cells；DH5α超級感受態細胞
菌種類型:?? ?E.coli
產品規格:?? ?20X110 微升
轉化效率:?? ?大于1X10的9次方
基因型:?? ?DH5α感受態細

胞基因型
抗性:?? ?無抗性
質粒轉化條件:?? ?42 ℃熱激
生長條件:?? ?37 ℃, ?有氧
用途:?? ?分子克隆。用于質粒擴增、重組質粒篩選、建立基因文庫和cDNA文庫。
菌株特點:?? ?
大腸桿菌DH5α超級感受態細胞是常用的克隆宿主菌株，用于Plasmid型載體的擴增；

RecA缺陷型，能夠減少重組現象；

能夠高效轉化分子量大的質粒，適用于建立基因文庫、和cDNA文庫。

DH5α可用于藍白斑篩選。
?
感受態制備方法:?? ?DH5α超級感受態細胞采用最新的二價錳法，Ultracompetent cell 轉化效率是常規氯化鈣法的10倍。
DH5α感受態細胞操作方法
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態于冰上或室溫融化。
2. 每100μl感受態加1ug質粒DNA混勻，依次于冰上靜置10分鐘、液氮5分鐘、37℃ 5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700μl無抗生素的2YT或LB液體培養基，于28℃振蕩培養2~3小時。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的2YT或LB平板上，倒置放于28℃培養箱培養2-3天。
DH5α感受態細胞注意事項
1. 感受態細胞最好在冰上融化。
2. 混入質粒時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?？上鄳獪p少最終用于涂板的菌量。
4. 誘導時，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。
5. 為獲得需要量的蛋白，最佳誘導時間，溫度，IPTG濃度需實驗者優化。
野生型E.coli并不容易轉化，DH5α感受態細胞這是由于細菌產生一種酶能迅速降解進入的外源DNA。經過多年的努力，科學家們發現了一種方法可以增加細胞吸收外源DNA的效率。那就是用化學方法處理細胞，使其改變膜對DNA的通透性。這種細胞就稱為感受態細胞，即細胞處于能攝入核酸分子時的生理狀態。這種方法已經成為基因工程的常規技術，它對于我們利用體外DNA重組技術來了解真核和原核生物的基因功能特別重要。細菌的轉化有兩種類型：一種是自然轉化（natural transformation），在自然轉化中細菌可以自由地吸收DNA，通過它來進行遺傳轉化；另一種是工程轉化（engineered transformation），在這種轉化中，細菌發生改變使得它們能攝入并轉化外源DNA?？莶輻U菌中的轉化屬于自然轉化，E.coli轉化就屬于工程轉化。

溫馨提示：不可用于臨床治療。
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