新來的師弟師妹,郎才女貌,甚是般配。同樣的愛好,同樣的啥都不會。我一直以為配制培養基平板是最簡單的事情了,稱量、兌水、滅菌、倒制就行了,直到這倆活寶的到來。
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在三角瓶里配制培養基,如果在一個三角瓶滅菌,那么體積有點大,滅菌過程可能會溢出,所以要加熱至澄清透明,完全溶解后,分裝到兩個三角瓶中,結果加熱到這樣子就打算分裝。

這樣根本沒溶解好不好?師弟說培養基怎么可能會澄清透明?還和我舉例子,紅酒是澄清的,也不可能完全透明啊,我這好為人師的重大疾病立馬犯了。別整這么多沒用的,接著加熱。

終于守得云開見月明,一杯澄清賽啤酒的 TSA 培養基問世了。
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實驗室沒捆扎用的粗棉線了,告訴他們去買點棉線,因為棉線和尼龍線不太容易區分,特意告訴他們帶上打火機,點一下,如果繩頭點燃后有硬疙瘩,那就是尼龍繩,尼龍繩不耐高溫滅菌。所以必須要棉線,粗的棉線!棉線點燃后會有灰燼,但不會出現硬疙瘩。
于是棉線買來了,嗯,確實是棉線,但不粗,是縫衣線!

縫衣線能不能用?能用,但太細了,這東西捆扎瓶口勒的手指頭疼,而且在超凈工作臺里,戴著手套,不好捏住繩子頭。不便于操作。不過,沒買回來尼龍繩,大家表示很滿意了。大不了后面有空了,把縫衣線搓成粗線用就是了。
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下一步應該是放進滅菌鍋濕熱滅菌,然后在超凈工作臺倒制平板冷卻凝固。但師妹卻告訴我培養基是應該先倒進平皿,等凝固了再用報紙包起來放進滅菌鍋滅菌,這樣的好處是省去了后面的超凈工作臺操作,不用再倒制。
這一剎那,我產生了郎才女貌,天作之合的驚愕感。我說培養基會在滅菌過程沸騰出來的,不能這么干,除非是培養基不想要了。師妹恍然大悟,對對對,我說的是銷毀染菌的培養皿的操作方式。
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在超凈工作臺倒制平板,不是什么困難事,所以直接讓這倆活寶去操作了。等我進潔凈室看他們操作時,真的慌了,二位開著紫外燈!開著紫外燈就上手倒平板了!趕緊關上紫外燈,看了下包裹的嚴嚴實實,還戴著近視鏡的倆活寶,「如果,你們眼睛沒有紅腫,記得感謝自己的近視鏡!」
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安排他倆把滅培養基的三角瓶清洗一下,忘了多做交代,然后發現把棉塞給洗了。無語問青天,這得啥時候干???

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新人嘛,首次倒制平皿,染菌也是情有可原。但我后悔帶菌物質銷毀沒解釋清楚。是的,帶菌的平皿放在滅菌鍋里 121℃ 30 分鐘,但平皿是要放進搪瓷杯或者大燒杯里。沒告訴他燒杯是必須的,接下來的事立馬警示我,說話要說全!因為他把平皿直接堆在滅菌鍋里滅菌,滅菌效果不錯,但鍋里全是培養基溶液,高壓沸騰使得培養基進入了滅菌鍋的沸水區域,然后在冷卻的過程中,二次凝固的培養基把排水口堵住了!
當然,處理起來也不是太難,把滅菌鍋里的水加熱,趁熱把水全部排出,然后繼續加水再加熱,往復幾次也就行了。
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刷完培養皿,直接全部倒扣在試驗臺上。嗯,標準的倒扣。這得啥時候才能干燥?

正確的明明是這樣的好不好?依次傾斜羅列,才便于干燥。

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為了分別不同的平板培養基,大家都習慣于在培養皿上標上培養基名稱,比如 TSA,SIM 什么的標識,都是用油性筆寫的。沒覺得清洗起來是件困難的事,但師弟表示這太困難了,并特意去買了餐洗凈來洗。把大家嚇了一跳,畢竟我們已經習慣了用 95% 乙醇來擦去字跡的。
當然,師弟師妹虛心接受了教育,但有一事不明,為啥他們的培養基會被污染了呢?明明帶了口罩手套,還穿了無菌衣?
此時我們放出了在潔凈室窗口拍下的畫面。


手套沒戴好,導致有些精細操作無法正常完成;再就是口罩和無菌衣未準確穿著,可以看到前額的頭發是露出的,而且口罩沒有完全遮擋面部。
師弟師妹表示,之前做的實驗太少了,也沒領會到要領,這才一下子出了這么多的錯誤。沒想到配個培養基還有這么多道道。確實如此,做實驗步步小心謹慎,眼高手低要不得。